Sadržaj
Do 1882. mikroorganizmi su izolirani pripremanjem serijskih razrjeđenja uzoraka u tekućem mediju. Ovom metodom izolirani su organizmi u većem broju, ali je mikrob u manjoj količini, uzrokujući bolest, obično ostao nezapažen. Godine 1882. Walther Hesse i Angelina Fannie, koji su radili u laboratoriju njemačkog liječnika Roberta Kocha, razvili su agar za upotrebu kao sredstvo za stvrdnjavanje. Sredstva koja sadrže tu tvar osiguravaju čvrstu površinu tako da veliki broj mikroorganizama može rasti i biti izoliran.
Agar osigurava kruti medij za izolaciju mikroorganizama (Comstock / Comstock / Getty Images)
Izvori agara
Agar se izdvaja iz nekoliko vrsta crvenih algi i stijena, kao što su Pterocladia i Gelidium. Druge vrste algi, kao što su Gelidiella i Gracilaria, također proizvode agar, ali ima više temperature gela, što ga čini neprikladnim za mikrobne kulture. Postupak pripreme standardnog bakteriološkog agara iz algi je strogo nadziran proces koji zahtijeva specijaliziranu opremu i strogu kontrolu proizvodnog medija.
Kemija agara
Agar je ugljikohidrat lanca polimera koji se sastoji od galaktoznih jedinica. Kada se otopi u kipućoj vodi i podvrgne hlađenju, ona gelira i tvori želatinastu masu. Ovaj proces se odvija između 34 i 36 ° C i agar ostaje čvrst do 65 ° C.Ova tvar također podnosi sile smicanja, tako da proizvedeni gel zadržava svoju čvrstoću u laboratorijskim uvjetima. Iako želatina ima slična svojstva geliranja, nije otporna na napade bakterijskih enzima. Na agar se ne utječe, tako da je moguće pripremiti medij kulture bez upotrebe inhibitora, koji mogu ometati rast razvijenog mikroba.
Upotrebom agara
Većina medija sadrži agar u koncentraciji u rasponu od 1 do 2% ukupnog volumena kulture. Ova vrijednost omogućuje skrućivanje dovoljnog medija bez izazivanja problema za rast organizama. Niže koncentracije u rasponu od 0,05 do 0,5% upotrebljavaju se u medijima za kulturu koji se koriste za rast mikroaerofila, anaeroba i za pokuse pokretljivosti. Agar je sastavni dio većine kultura korištenih u kliničkim mikrobiološkim studijama, auksotrofnim i genetskim istraživanjima te bakterijskim transformacijama.
Vrste agara
Tip agara koji će se koristiti ovisi o specifičnoj svrsi mikrobne kulture medija. Prosječni hranjivi agar je koristan za rast većine gljivica i bakterija. Ono što nema hranjivih tvari općenito se koristi za rast organizama koji nisu bakterijski. Krvni agar sadrži krvne stanice i također pomaže rast bakterija. Sabouraud agar je koristan za selektivni razvoj gljivica.