Sadržaj
Prednosti i nedostaci svjetlosnog mikroskopa odnose se na svjetlost, povećanje i razlučivost. Svjetlosni mikroskopi povećavaju vidljivu svjetlost - očita prednost, jer to naše oči mogu vidjeti. Međutim, povećanje (koliko se veliki objekt pojavljuje) i razlučivost (jasnoća detalja) ograničeni su kada se koriste svjetlosni mikroskopi.
Izvor svjetlosti
Svjetlosni mikroskopi koriste reflektirajuće ogledalo ili električno svjetlo za izravno osvjetljenje kroz uzorak i u sustav leća. Zrcalni sustavi su jeftiniji, ali zahtijevaju odgovarajuću ambijentalnu rasvjetu i više strpljenja za prilagodbu. Električni svjetlosni sustavi su skuplji i zahtijevaju utičnicu u blizini, ali jednostavniji su za upotrebu.
Intenzitet svjetlosti
Intenzitet svjetline (svjetlina) je važan, jer svjetlost prolazi kroz uzorak koji gledate. Tanak, proziran uzorak (bistri) najbolje se gleda sa svjetlošću niskog intenziteta, dok deblji i neprozirni uzorci zahtijevaju svjetlost većeg intenziteta. Nedostatak svjetlosne mikroskopije je taj što su neki uzorci previše debeli ili neprozirni da bi se mogli vidjeti pod ovom vrstom mikroskopa. Vrlo tanki ili prozirni uzorci mogu se bojiti kako bi se povećao kontrast radi bolje vizualizacije. Međutim, ovaj će postupak ubiti žive primjerke.
Podešavanje intenziteta svjetlosti
Dijafragma, smještena iznad izvora svjetlosti i ispod pozornice (platforma za uzorke), podešava količinu svjetlosti koja prolazi kroz uzorak. Dostupne su dvije vrste membrana: birač fiksnog otvora blende i prilagodljivi otvor blende u stilu kamere.
Fiksni otvor sastoji se od nekoliko različitih veličina otvora na rotirajućoj ploči. Okretanjem kotačića odabire se željeni otvor blende. Dijafragme s fiksnim otvorom su jeftinije, ali nude manje preciznu kontrolu nad intenzitetom svjetlosti.
Podesiva dijafragma otvora blende pruža kontinuirano promjenljivu veličinu otvora blende, baš kao i f-stop na objektivu fotoaparata, i na taj način omogućuje precizniju kontrolu intenziteta svjetlosti. Ti su sustavi skuplji.
Proširenje
Veće nije uvijek bolje. Svjetlosni mikroskopi mogu jako uvećati predmete do 1000x (tisuću puta veće od života). Uz to, slika postaje sve iskrivljena i mutnija. Povećavanje veličine ne čini bolju sliku, a zapravo je čini neupotrebljivom.
Korištenjem povećanja do 1000x mogu se vidjeti sve vrste živih organizama, čak i najmanje bakterijske stanice. To svjetlosnu mikroskopiju čini moćnim alatom za proučavanje vrsta stanica, vode u jezeru, uzoraka tla i drugih studija, gdje je poželjan pregled mikroorganizama. Svjetlosna mikroskopija, međutim, slabo koristi za proučavanje subćelijskih struktura zbog ograničenja razlučivosti svojstvenih korištenju svjetlosti.
Razlučivost
Rezolucija je mjera jasnoće dobrih detalja na slici. Slike niske razlučivosti izgledaju mutno ili "mutno". Slike visoke rezolucije su oštre, jasne i detaljne. Najveći nedostatak svjetlosnih mikroskopa je ograničenje razlučivosti. Osim povećanja od 1000x, svjetlosni mikroskopi brzo gube sposobnost finog podešavanja malih detalja. To je rezultat fizikalnih svojstava svjetlosti, a ne kvalitete instrumenta. Za bolje razrješenje detalja subćelijskih struktura treba koristiti druge tehnologije, poput elektronskih mikroskopa.
