Sadržaj
- Bolja vizualizacija
- Identifikacija i klasifikacija
- Detekcija izvedivosti
- Identifikacija staničnih struktura
Mikrobiolozi proučavaju svojstva mikroorganizama, kao što su alge, bakterije, protozoe, gljivice i virusi, pomoću mikroskopa. Iako su neki organizmi, kao što su protozoe i stanice kvasca, lako vidjeti kroz stakalca, bakterijske stanice zahtijevaju bojenje. Znanstvenici su razvili brojne metode, kao što je tehnika bojanja po Gramu, bojenje kiselinom i fluorescentno bojenje za poboljšanje vizualizacije bakterijskih stanica i staničnih struktura. Pomoću takvih metoda bojenja moguće je identificirati strukturne karakteristike koje pomažu klasificiranju bakterija.
Bolja vizualizacija
Bakterijski organizmi su toliko mali da je većina njih vidljiva samo pod mikroskopom s povećanjem od 1000 puta. Međutim, jednostavno proširenje ne osigurava dovoljan stupanj jasnoće, tako da bakterije stoga moraju biti obojene prije promatranja kako bi se osigurala jasnoća potrebna za vizualizaciju.
Identifikacija i klasifikacija
Bojenje bakterija za razlikovanje vrsta bakterija poznato je kao diferencijalno bojanje. Gramno obojenje je diferencijalno bojanje koje razlikuje bakterije kao funkciju sadržaja stanične stijenke. U ovoj metodi bakterijske stanice reagiraju s kristalnom ljubičastom bojom kako bi postale ljubičaste. Dodavanjem sredstva za promjenu boje neke bakterijske stanice gube boju, dok druge ne. Dodavanjem safranin boje obojene stanice dobivaju crveno bojenje, dok bakterijske stanice koje ne gube boju ostaju ljubičaste. Crvene stanice nazivaju se gram-negativni organizmi, a one koje ne postaju crvene klasificiraju se kao gram-pozitivni organizmi. Tehnika bojenja Gramom osigurava brzu metodu za početnu identifikaciju bakterija uključenih u infekcije. Isto tako, proces bojenja otpornog na kiseline pomaže u specifičnom identificiranju organizama koji pripadaju skupini bakterija koje se nazivaju mikobakterije, kao što je Mycobacterium tuberculosis.
Detekcija izvedivosti
U uzorcima bakterijske kulture često je važno otkriti prisutnost živih bakterijskih stanica. Postupci kao što je fluorescentno bojenje pomažu identificirati da li su stanice kulture održive ili ne. Žive bakterije imaju sposobnost pretvoriti tetrazolijev klorid 5-cijano-2,3-ditolil (CTC) u boju koja pokazuje crvenu fluorescenciju. Stoga, kada kulture CTC boje emitiraju te fluorescencije, to ukazuje na prisutnost vitalnih bakterija. Propidij jodid je boja koja djeluje samo na neživu stanicu koja ima oštećene membrane i stoga je korisna u identificiranju mrtvih bakterijskih stanica.
Identifikacija staničnih struktura
Bojanje pruža jasnu metodu vizualizacije za različite stanične strukture. Primjerice, Feulgenov postupak bojenja omogućuje identifikaciju jezgre unutar bakterijskih stanica, dok je Albertovo bojenje korisno u vizualizaciji metakromatskih granula. Isto tako, tehnika impregnacije srebrom omogućuje identifikaciju spiroheta. Žabice su lako vidjeti kad su obojene bojom Ryua. Malahitno zeleno bojenje pomaže identificirati bakterijske spore.
